ساخت ناقل یوکاریوتی دو سیسترونی بیان کننده ژن&rlm;های m۱ و نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزا

Authors

mohammad shenagari

ph.d. student, department of virology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university farzaneh sabahi

associated professor, department of virology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university masoumah tavasoti kheiri

assistant professor, department of influenza, pasteur institute of iran kambiz forghan parast

associated professor, department of bacteriology, faculty of medicine, gilan university of medical sciences, iran abbas jamali

abstract

هدف: در این پژوهش در راستای راه‏اندازی یک واکسن جامع براساس واکسن ژنی، دو ژن محافظت شده در سویه‏ها و زیرگونه‏های مختلف ویروس آنفلوانزا (m1 و نوکلئوپروتئین) در ناقل دوسیسترونی یوکاریوتی بیان شد. مواد و روش‏ها: پلاسمیدهای m1-pires2-egfp و pires2-np به‏ترتیب با کلون کردن محصولات pcr ژن‏های m1 و نوکلئوپروتئین برگرفته از ویروس آنفلوانزا h1n1 سویه a/peurto rico/8/34 در داخل ناقل بیانی pires2-egfp ساخته شد. به‏منظور ساخت پلاسمید دو سیسترونی m1-pires2-np، ژن m1 از پلاسمید m1-pires2-egfp استخراج و در پلاسمید pires2-np ساب کلون شد. در نهایت بررسی بیان این دو پروتئین در سلول‏های یوکاریوتی با ترانسفکشن کلون ساخته شده به داخل سلول bhk-21 با استفاده از ایمونوفلوئورسنس غیر‏مستقیم انجام شد. نتایج: موفقیت در کلونینگ صحیح ژن‏های مذکور با هضم آنزیمی و تعیین توالی قطعات کلون شده به اثبات رسید. بیان صحیح این دو ژن در سلول‏های یوکاریوتی با ترانسفکشن این کلون در رده سلولی bhk-21 و بررسی با روش ایمونو فلورسنس به اثبات رسید. نتیجه‏گیری: بیان همزمان دو ژن m1 و نوکلئوپروتیئن ویروس آنفلوانزا در یک سازه ژنی با واسطه توالی ires ممکن است.

Upgrade to premium to download articles

Already have an account?login

similar resources

ساخت و آنالیز بیان ناقل گیاهی pCaBGi

بیان موقت مبتنی بر تزریق اگروباکتریوم در برگ گیاه روش نسبتاً سریع و قابل اعتمادی برای آنالیز توالی‌های تنظیمی است. به منظور بهره‌گیری از مزایای این تکنیک یک ناقل بیانی مناسب برای انجام آزمون بیان موقت عناصر تنظیمی مبتنی بر تزریق اگروباکتریوم مورد نیاز است. در این مطالعه بمنظور ساخت یک ناقل بیانی گیاهی، جایگاه‌های آنزیمی مناسب از وکتور pBGi به عنوان قطعه در نظر گرفته شد و وکتور pCAMBIA3301 حامل ژ...

full text

ارزیابی ایمونولوژیکdna واکسن بیان کننده ژن m۲ ویروس آنفلوانزا در مدل موشی آنفلوانزا

چکیده زمینه و هدف: با به کارگیری ژنm2 که پروتئین حفاظت شده ویروس آانفلوانزا را بیان می کند می توان واکسن پایدار و ثابتی را تولیـد کرد که نیاز به تجدید سالیانه را مرتفع سازد. روش بررسی: به سه گروه موش به تفکیک pcdna3-m2 و گروه های کنترل منفی pcdna وpbs در سه دوز و به فاصله دو هفته تزریق شد. دو هفته پس از آخرین تزریق، میزان ایمنی سلولی با به کار گیری روش تکثیر لنفوسیتی m‏tt و سنجش اینترفرون گاما ...

full text

ارزیابی روش تزریق عضلانی و داخل جلدی پلاسمید باکتریایی حاوی ژن نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزا

هدف: استفاده از واکسن‏های ژنی بر پایه کاربرد پلاسمیدهای باکتریایی به‏منظور القای ایمنی سلولی بر ضد عوامل بیماری‏زا یکی از رویکردهای نوین به‏شمار می‏رود. ساز و کارهایی که توسط آن سلول‏های ایمنی اختصاصی بر ضد آنتی‏ژن عرضه شده توسط واکسن‏های پلاسمیدی شکل می‏گیرند، هنوز به‏طور کامل شناخته شده نیست. از این‏رو، لازم است تا چند راه تزریق واکسن به‏منظور یافتن بهترین راه ایمن‏سازی در مورد هر آنتی‏ژن منح...

full text

طراحی و ساخت یک سازه ژنی نوترکیب بیان کننده پروتئین p24 ویروس لکوز گاوی در اشرشیاکلی

لکوز انزئوتیک گاوی(EBL) یک بیماری رتروویروسی است که بوسیله ویروس لکوز گاوی (BLV) ایجاد و عموماً در دامداری‏های صنعتی مشاهده می‏شود. این بیماری موجب کاهش توان تولید و بروز خسارت‏‏های اقتصادی قابل توجه در گله می‏شود. کنترل عفونت‏های ناشی از BLV با انجام آزمایش‏های سرولوژی، شناسایی و جداسازی یا حذف حیوانات سرم مثبت انجام می‏گردد. در این مطالعه، ژن پروتئین p24 از BLV پس از تکثیر توسط PCR، به پلاسمید...

full text

بیان دو سیسترونی ژن‌های رمز کننده آنتی‌بادی مونوکلونال trastuzumab در توتون با استفاده از یک توالی جایگاه میانی ورود ریبوزوم

آنتی‌بادی‌های مونوکلونال هترودایمرهای متشکل از چهار زنجیره پپتیدی، دو زنجیره سبک (L) یکسان و دو زنجیره سنگین (H) یکسان هستند. بیان همزمان مقدار برابر ژن‌های رمز کننده برای تولید پایدار و گردایش به صورت یک آنتی‌بادی کارکردی ضروری است. به منظور بیان هم‌زمان چندین ژن، سیستم‌های مختلفی از جمله وکتورهای مبتنی بر جایگاه میانی ورود ریبوزوم (IRES) توسعه یافته‌اند. در مطالعه حاضر، یک حامل دی‌سیسترونیک ب...

full text

کلونینگ و بیان پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا H1N1 در باکتری Ecoli سویه BL21(DE3)

سابقه و هدف: ویروس انفلوانزا A یکی از عوامل اصلی مرگ ومیر سالیانه می باشد و از سال 1960 میلادی بر علیه آن واکسن موثر در دسترس بوده است. تغییرات مداوم آنتی ژنیک ویروس چالش بزرگی در مسیر تولید سالیانه واکسن می باشد. در حال حاضر محققین روی آنتی ژنهای ثابت ویروس مطالعه می کنند. پروتئینM2 یک کانال یونی درون پوشش ویروس انفلوانزای A تشکیل می دهد که در عفونت زایی آن موثر است. این پروتئین حفاظت شده ا...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}

Journal title:

پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۵۱-۶۲

Keywords

ویروس آنفلوانزا ناقل دو سیسترونی ژن m1 ژن نوکلئوپروتئین بیان همزمان

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com